Biología Molecular

Objetivo
1. Investigación en el área de la biología molecular de Trypanosoma cruzi

2. Asesoramiento y soporte en técnicas de Biología Molecular.

 

Personal
PIN - Asistente UCV
Teresa Abate
Técnico contratado por proyecto CONICIT
Esperanza Moreno

Pasante. Estudiante del Postgrado de Inmunología. Instituto de Inmunología UCV
Liliana Rivas

 

Líneas de Investigación
Aislamiento y caracterización de antígenos recombinantes específicos de Trypanosoma cruzi

 

Proyectos en desarrollo
Trypanosoma cruzi y Trypanosoma rangeli: identificación y caracterización genética de antígenos no comunes.
Proyecto CONICIT S1- 96001924

 

Objetivos
- Construcción de una genoteca de sustracción de T. cruzi con T. rangeli.
- Identificación de los clones antigénicos por despistaje inmunlógico de la genoteca con sueros de pacientes chagásicos.
- Estudios de sensibilidad y especificidad de los antígenos aislados.
Este Proyecto cuenta con la colaboración de la Sección de Inmunología, I.M.T.

Clonamiento del gen de la glutamato deshidrogenasa de un aislado venezolano de Plasmodium falciparum.
En colaboración con:
Dr. Alexis Rodríguez, Sección de Inmunoquímica, I.M.T.
Dra. Carmen Elena Contreras, Instituto de Inmunología.

Experimentos de hibridación in situ para el estudio de la expresión de algunos miembros de la familia de los TGFs y sus antagonistas en el corazón de embrión de pollos.
En colaboración con:
Dr. Héctor Arrechedera, Sección de Biología Celular, I.M.T.

Ensayos de PCR en heces de chipo (por iniciarse)
En colaboración con:
Dr. Matías Reyes, Sección de Entomología Médica, I.M.T.

 

Logros
Los logros evidenciados por las publicaciones más recientes se inscriben dentro del área de la identificación, caracterización y potencial uso diagnóstico de antígenos recombinantes de T. cruzi.

Se destaca la identificación de la ubicuitina como proteína antigénica en la Enfemedad de Chagas, a pesar de ser una de las proteínas más conservadas a lo largo de la escala filogenética. Nuestros trabajos previos han demostrado que no presenta reactividad cruzada con la ubicuitina humana y muestra buenos niveles de sensibilidad y especificidad. Ello la convierte en candidata para el desarrollo de ensayos inmunodiagnósticos.

A nivel básico hemos podido demostrar una expresión diferencial cualitativa de los genes que codifican para la ubicuitina en dos estadíos distintos del ciclo de vida de T. cruzi.

Nuestra actual línea de investigación fue concebida como continuación de estos logros, enfocándonos en particular en la identificación de antígenos recombinantes de T. cruzi que no se expresen en T. rangeli, parásito que por compartir hospedadores y vectores con T. cruzi, y por mostrar hasta un 60% de reactividad cruzada con el mismo, representa un serio problema para el diagnóstico efectivo y los estudios epidemiológicos de la Enfermedad de Chagas en nuestro país.

 

Técnicas de Investigación 
Construcción de genotecas
Despistaje inmunológico de genotecas
Ligación y transformación bacteriana
Ensayos de PCR
Purificación de productos de PCR
Electroforesis en geles de agarosa y de agarosa/formaldehído
Aislamiento de DNA tanto genómico como plasmídico
Digestiones con enzimas de restricción
Aislamiento de ARNm
Hibridación de ácidos nucléicos

 

Publicaciones (1995-2000)
1.- Telles, S., Abate, T., Slezynger, T.C., Henríquez, D. (1999).Trypanosoma cruzi and human ubiquitin are immunologically distinc proteins despite only 3 aminoacids difference in their primary sequence.FEMS Immunology and Medical Microbiology. FEMS Immunol. Med. Microbiol. 24: 123-30.
 

2.-Abate, T. (1997). Antígenos recombinantes de Trypanosoma cruzi. Archivos Venezolanos de Medicina Tropical. 1(1): 1-15.